Xantocromía
El término xantocromía describe el sobrenadante del LCR centrifugado. Aparece entre 2 y 4 horas después de una hemorragia subaracnoidea, alcanzando su máxima intensidad entre las 24 y 36 horas y desapareciendo entre los 4 y 8 días (puede persistir hasta 4 semanas). El sobrenadante de muestras traumáticas es transparente, ya que la xantocromía aparece cuando los eritrocitos se han lisado (presentes en el LCR entre 1 y 4 horas).
Colores de la Xantocromía
- Rosa: Presencia de oxihemoglobina por lisis de eritrocitos antes o durante la punción lumbar.
- Anaranjado: Hemólisis intensa.
- Amarillo: Conversión de oxihemoglobina a bilirrubina no conjugada.
El examen de la xantocromía requiere centrifugar el LCR antes de una hora para evitar la lisis de hematíes por punción traumática. La determinación de pigmentos se realiza mediante técnicas espectrofotométricas.
Falsas Xantocromías
Pueden observarse falsas xantocromías por:
- Bilirrubina plasmática elevada (> 5 mg/dl).
- Demora en la centrifugación de un LCR hemático.
- Hipercarotenemia.
- Melanosarcoma en las meninges.
- Contaminación con desinfectantes.
En recién nacidos prematuros, la xantocromía puede deberse a la combinación de bilirrubina elevada e inmadurez de la barrera hematoencefálica.
Coagulación
El LCR sanguinolento coagulará si la punción es traumática, pero no si la sangre proviene de una hemorragia subaracnoidea.
Recuento Celular
El LCR contiene un pequeño número de células, generalmente leucocitos mononucleares (linfocitos y monocitos). Los valores normales en adultos oscilan entre 0 y 5 leucocitos/µl, con un límite de 5 a 10 células/µl. Niveles elevados se denominan pleocitosis. En recién nacidos, hasta 30 células mononucleares/µl se consideran normales.
Técnicas de Recuento
El examen microscópico del LCR incluye:
- Conteo en cámara (Neubauer, Fuchs Rosenthal, Kova): Determina la concentración de células (leucocitos y hematíes).
- Citocentrifugación: Permite el recuento diferencial de leucocitos sin alterar su morfología para su posterior identificación mediante tinción May-Grünwald-Giemsa.
El recuento debe realizarse inmediatamente después de la extracción, ya que los leucocitos comienzan a lisarse en aproximadamente 1 hora. Si la analítica no se realiza con rapidez, las muestras deben refrigerarse.
Recuento Celular Total
Técnica
- Homogeneizar la muestra.
- Diluir si el LCR es muy turbio.
- Cargar un retículo de la cámara de Neubauer con LCR y contar las células en los cuatro cuadrados grandes de las esquinas.
- Calcular el número de leucocitos/µl.
También se puede utilizar la cámara de Fuchs Rosenthal, que no requiere dilución de la muestra, o la cámara de Kova.
Recuento Diferencial
Normalmente, los leucocitos presentes en el LCR son linfocitos y monocitos. En adultos predominan los linfocitos, mientras que en niños la relación es inversa.
Técnica
Si el número de células es muy abundante, no es necesario concentrarlas. Si el número de células es bajo, se pueden concentrar mediante:
- Centrifugación
- Técnicas de filtración
- Citocentrifugación
- Sedimentación celular
La citocentrifugación es el método de elección, pero no está disponible en todos los laboratorios.
Análisis Bioquímico
Comprende el estudio de proteínas, glucosa, glutamina, iones (cloro), ácido láctico y enzimas (LDH).
Proteínas
Las proteínas del LCR provienen de un ultrafiltrado del plasma y de la síntesis intratecal. La albúmina es la proteína mayoritaria. A diferencia del suero, el LCR no presenta fibrinógeno ni lipoproteínas beta.
Las cifras normales de proteínas totales varían según la edad y el origen de la muestra. Se produce un incremento de las proteínas en el LCR debido a:
- Aumento de la permeabilidad de la barrera hematoencefálica
- Incremento en la síntesis en el interior del SNC
Métodos de Determinación de Proteínas en LCR
Debido a la pequeña cantidad de proteínas en el LCR, las técnicas utilizadas deben ser sensibles y requerir pequeñas cantidades de muestra.
Métodos para Determinación de Proteínas Totales
- Métodos turbidimétricos
- Métodos de fijación con colorantes
- Métodos químicos: Método de Biuret modificado
Métodos para Determinación de Fracciones Proteicas
- Electroforesis
- Inmunodifusión radial
- Turbidimetría
- Nefelometría
- Electroinmunodifusión
Glucosa
La glucosa del LCR proviene de la glucosa sanguínea. El valor normal de glucorraquia es de 0,40 – 0,80 g/l (40-70 mg/dl), entre el 60 y el 70% de los valores en suero. Los valores bajos son de gran valor diagnóstico en la determinación del microorganismo causal de la meningitis.
Lactato
La determinación del lactato es útil para el diagnóstico y tratamiento de la meningitis. Normalmente, en las meningitis bacterianas, tuberculosas y micóticas, la concentración de lactato aumenta por encima de 25 mg/100ml. Es un método sensible para valorar la eficacia de los antibióticos.
Glutamina
Las células cerebrales producen glutamina a partir de amoniaco y α-cetoglutarato. La concentración normal de glutamina en LCR es de 8-18 mg/dl. Los niveles pueden elevarse en trastornos hepáticos y en el síndrome de Reye.
Determinación de la Concentración de Enzimas
- Creatincinasa: Se eleva en lesiones cerebrales isquémicas.
- Adenosin-desaminasa (ADA): Aumenta en la meningitis tuberculosa y en la infiltración por linfomas.
- Láctico deshidrogenasa (LDH): Aumenta en traumatismos cerebrales, afecciones degenerativas, convulsiones, meningoencefalitis y tumores.
Análisis Microbiológico
El estudio microbiológico del LCR se realiza para identificar los microorganismos causantes de meningitis. Se suele efectuar una tinción Gram, y en caso de sospecha de meningitis tuberculosa, la tinción Ziehl-Nielsen o Auramina. El cultivo permite la identificación del microorganismo y determinar su patrón de sensibilidad a los antibióticos.
También se pueden realizar pruebas serológicas en LCR, especialmente útiles cuando la tinción Gram es negativa y los cultivos no revelan crecimiento.