Técnicas de Inmunodiagnóstico
Ind: susp GR sensib cn Ag. Coombs: lleva ac frente ac hum, si se incuba cn gr lavados, provica aglut. Cooms ind: s pr cn gr Rh+, si hay IgG antirh se unirán y coombs aglutina. Inm electro: ident frac P especi en mezcla ag, en muestra hallar ac espe frente una deter fracción ag y pureza ag, especificidad. Cntrainmnoelectrforesis-doble dif forzada, cuali. elctroinmnodifsion-cohete, inmunodif radial. FIJA C: med ind Ac. Hemo:56-30′ xra destruir C. Comple: – lisis incom, + no can’ser fijadas x CI-FN, Ag: + interfiere a fij C, – no fijan el C en cant demostrables. Detec Ac en suero(ag cm reactivo) hemo –, C no se fijo en 1 reacion, no hemo +, el C se agotó
Técnicas de Inmunofluorescencia
FIE: usan sust capa emit fluor al ser excit cn E radiante,sust fluo acopladas en Ac o Anti Ac>conjugado, usa ag formes o part, IFD. Feie: a partir d no fluor.. P enzi capaz d emitir f y se Detecta en fluorimetro.Elfa-sand(det IgE-Cap) Meia: sand no comp, xra molec grandes. RIE: isot radioac, molec marcada-trazador, centelleo o con gamma (Yodo) hormonas.
Técnicas de Quimioluminiscencia
QUIM: sust quimio q emi luz cuando reac enzi. Espectro quimio o luminometro. +sensi q color, elisa. Marcqui emite luz al ser oxi x peroxidos en presen d cat. CMIA: ¡sens, reuma y Pc, sand no compe. ICRO: nanopart colo, o-r. Ria liquida: titulación antisuero: ajuste [ ] Ac espe, selec diluc antisuero, ensayo desplazax:incubar Agx-traza, antisuero-Ac y muestra (agx compite ag m) Para recuento trazador libre, elimina traza unido mediante precipitación Ag-Ac. Ria solida: facilit sep trazadores libres y unidos(fija ag-M.ac-antac conju). Rast: ag espe.
Técnicas de Inmunotransferencia (Western Blot)
WEST: detec P después d fijar en MB con Ac marcados con E, para ver results +, los sustratos deben generar products fin color insolubles q precipiten. Resultado, revelado con peli autorradiograficas, recogen imagenes y transf la señal en imag digital. DOT: ac fijado en MB, ag muestra, y conjugado el Ac marcado cn encima. Inmtrans,blotting o wb: transfer P:inmunoreaccion mediante transferencia electrica, mb + comu .., reconocimi P: inmuno enzimatica, directac sobre mb usando sustratos q dan productos insolubles coloreados, el revelado IC sigue a otras tec q usan Ac marc, mejora sensib respecto inmunoelectrofo.. Pr,Fa, tb sist radioquim revelado, uso Ac secun unidos a yodo125 y post deteccion con sutorradiografia
Técnicas de Aglutinación
AGLU DIR:
- a)soporte plano o microtitul
- b)hemaglut dir. ABO y RH
AGLU IND: AGparticulado
- a)AGdeLatex en placa
- b)HAI: +velo -anillo o boton.
- c)INHIB de Hemaglut: virus+AC+Hemat. +boton -velo
PRUEBA COOMBS:
- a)dir: detecta AC en Hemat
- b)ind:AC antiRh de suero mat.
Técnicas de Inmunodifusión
DOBLE DIF: Ag y Ac libres. cualitativa
INMUDIFRADIAL: 1 libre otro en gel cualitativa o cuantitativa
INMUNOELECTROF: electrof e inmunodifu 1ºseparacion de los 2comp 2ºinmunoduf libre cualitativa muy especifica.
INMUFIJACION: variante de la ant. Evalua prot del mieloma. 5carriles con Sue +electric. En cada carril un antiSue.
CONTRAINMELECTROF: doble dif forzada. -t´y +sensible. Cualitativa
ELECTROINMUDIFU: difu radial forzada. +rápida y sensib rocket
Técnicas de Inmunoensayo Enzimático (ELISA)
INMENSAYENZIMULTIPLI:EMIT:homogeneo y competi entre AGm y AGmark nocolor+ color-
ELISAdirectDETEC AG: fija M. Adicion de conjuga ACenz color+
ELISAindirecDETEC AC: fija AG. Adicion de M. Adici conju antiACenz color+
ELISAsandAG DAS: fija AC. Adici de M. Adici ACenz color+
ELISAsandAG HADAS: fija AC(raton). Adici de M. AdiciAC(conejo). Adici de conju antiAC del conejo. color+
ELISAcompetiAC: fija AG. Adicion de mezcla(M+conju[ACenz]). compiten -[ACm] + ACenz y viceversa. color-
ELISAcompetiAG: fijac de AC. adicion mezclaAG(M y conju). compiten no color+
ELISAinhiAC: Preincub de M con AG. Tapizado ACespecific del AGpreincubado. Adicion dela preincubac (si hay ACen M se fijan al AG y no quedan libres) adicion de conjugado(AC para el AGpreincu marcadosE).