Técnicas de Recolección de Muestras Biológicas y Aislamiento en Medicina

Técnicas de Recolección de Muestras Biológicas

Recolección de RPBI

Se refiere a los materiales generados durante los servicios de atención médica que contienen agentes biológico-infecciosos y que pueden generar efectos nocivos a la salud y al ambiente.

NOM-087-ECOL-SSA1-2002

Objetivo: Proteger al personal de salud de los riesgos relacionados con el manejo de estos residuos, así como proteger el medio ambiente y a la población que pudiera estar en contacto con esos residuos dentro y fuera de las instituciones de atención médica.

Establece los requisitos para:

1. Identificación y separación
2. Envasado
3. Almacenamiento
4. Recolección y transporte extremo
5. Disposición final

Hemocultivos

El hemocultivo es un método diagnóstico que se realiza para la detección de microorganismos en la sangre y así, posteriormente, realizar la identificación y determinación de sensibilidad.

• Hemocultivo aerobio periférico: Se obtiene por punción directa en una vena distal.
• Hemocultivo anaerobio periférico
• Hemocultivo aerobio central: Siempre se acompaña de hemocultivo periférico, se debe tomar muestra de cada rama del dispositivo.
• Hemocultivos cuantitativos pareados: Dispositivos implantables de larga duración.
• Cultivo de punta de catéter o semicuantitativo: Se realiza al retiro de una vía central o periférica.

Importancia: Determinar la presencia de microorganismos en sangre obtenida con técnica aséptica, mediante la siembra de ésta en un medio de cultivo. En caso de bacteremia permite aislar el agente causal.

Datos

• Obtener la muestra antes de iniciar la terapia antimicrobiana.
• Tomar 2 ó 3 muestras en picos febriles.
• Evitar la contaminación externa.
• Obtener la muestra en cantidad suficiente (8-10 ml por botella en adultos y 1-3 ml en pacientes pediátricos).

Los datos de identificación son: el nombre completo del paciente, fecha, número de historia clínica, hora de toma y número de secuencia. Marcar los frascos en la habitación del paciente.

• Enviar los hemocultivos rápidamente al Laboratorio de Microbiología. Si no fuese posible, mantenerlos a temperatura ambiente por un máximo de 18 horas.

La toma de muestras sanguíneas para hemocultivo a través de un catéter venoso central (CVC) únicamente está permitida en los siguientes casos:

• Pacientes con imposibilidad absoluta de acceso venoso o arterial periférico.
• Paciente con trastornos muy graves de la coagulación que contraindiquen una punción venosa o arterial periférica.

• Orden médica del Médico responsable (sospecha de bacteriemia asociada a catéter).

Urocultivo

Es un examen de laboratorio para analizar si hay bacterias u otros microbios en una muestra de orina. Puede ser utilizado para buscar una infección urinaria en adultos y niños.

Fuentes

• Orina de micción espontánea
• Orina obtenida a través de cateterismo transuretral
• Orina obtenida a través de sonda vesical permanente
• Orina obtenida de pacientes pediátricos
• Orina obtenida a través de sonda de urostomía y nefrostomía
• Orina obtenida por punción suprapúbica

Transporte

Se recomienda en los primeros 15 minutos de la recolección.

• Temperatura ambiente.
• No exceder de dos horas, en caso contrario transporte a 4° C, mantener muestra refrigerada.

Tracto Gastrointestinal

Saliva

Hisopo Sublingual

Lavado Gástrico: Cuidados y Recomendaciones

• Recolectar la muestra de la mañana, luego de 6 horas de ayuno.
• Tomar la muestra con el paciente en reposo.
• Informar al laboratorio clínico el volumen probable que se va a obtener, ya que la proporción recomendada de fosfato trisódico es 2 cc por cada 10 cc de jugo gástrico obtenido.
• Proteger de la luz el frasco donde se recolecta la muestra durante su transporte.

En una muestra utilizada para la búsqueda de mycobacterias en niños y adultos que al no expectorar degluten sus esputos, para aumentar la sensibilidad de diagnóstico la muestra debe ser recolectada de manera seriada durante tres días consecutivos

Transporte: Inmediatamente luego de la recolección a temperatura ambiente, debe protegerse de la luz

Materia Fecal: Cuidados y Recomendaciones

• No cultive muestras de consistencia dura.
• Para estudio de rotavirus y Clostridium difficile, enviar muestra diarreica y no utilizar escobillón.
• En el caso de pacientes pediátricos, si no es posible recoger muestra de materia fecal se puede tomar la muestra a través de frotis rectal.
• No se recomienda realizar coprocultivo de rutina para pacientes con estancia hospitalaria mayor de 3 días, a no ser que el diagnóstico de ingreso haya sido gastroenteritis

Transporte: Se recomienda durante la primera hora luego de la recolección a temperatura ambiente. Para estudio de mycobacterias debe enviarse inmediatamente al laboratorio, protegida de la luz directa.

Hisopo Rectal/Fecal: Cuidados y Recomendaciones

• Recomendado en pacientes pediátricos y adultos incapaces de recolectar muestra de materia fecal.
• Recomendado para detección de Neisseria gonorrhoeae, Shigella, Campylobacter, Herpes simplex y portadores de Streptococcus del grupo B y otros Streptococcus Beta-hemolytico.
• La muestra fecal debe ser visible en el escobillón para la detección de los patógenos.
• En virología la muestra es útil para la detección de virus entéricos como: adenovirus, calicivirus, astrovirus y rotavirus.
• Para búsqueda de enterovirus poliovirus o no poliovirus en pacientes con síndrome Guillain Barré.

Transporte: Se recomienda durante la primera hora luego de la recolección a temperatura ambiente. Estudios virales deben enviarse al Instituto Nacional de Salud en medio de transporte viral.

Tracto Respiratorio

Expectoración: Cuidados y Recomendaciones

• Instruir al paciente para realizar cepillado de dientes y lavado de lengua solo con agua.
• Realizar nebulización con solución salina normal.
• Para pacientes pediátricos incapaces de producir un esputo, la terapeuta respiratoria debe obtener la muestra a través de succión

Transporte: Se recomienda en los primeros 15 minutos de la recolección, no exceder de dos horas y a temperatura ambiente

Exudado Faríngeo: Cuidados y Recomendaciones

• No contaminar el escobillón con secreción de cavidad oral o dientes.
• El hisopado de garganta está contraindicado en pacientes con diagnóstico de epiglotitis.
• No hacer gárgaras ni limpieza con ninguna solución bucofaríngea

Transporte: Se recomienda en los primeros 15 minutos de la recolección, no exceder de dos horas y a temperatura ambiente.

Exudado Nasofaríngeo: Cuidados y Recomendaciones

• La persona que obtiene la muestra debe usar barreras de protección (mascarilla, protección ocular).
• No hacer gárgaras ni limpieza con ninguna solución bucofaríngea
• Tomar la muestra preferiblemente en ayunas. No se recomienda el cultivo rutinario de nasofaringe

Transporte: Se recomienda en los primeros 15 minutos de la recolección, no exceder de dos horas y a temperatura ambiente

Lavado Faríngeo

Líquido Pleural: Cuidados y Recomendaciones

• La recolección de muestras de este origen está reservada estrictamente al médico especialista.
• No se recomienda usar escobillones, la muestra debe ser obtenida por aspirado o drenaje quirúrgico.
• Los líquidos susceptibles de formar coágulo deben ser colectados en tubos con anticoagulante SPS (polisulfonato de sodio) para pruebas especiales, excepto si se está haciendo búsqueda de Neisseria meningitidis, Neisseria gonorrhoeae, Peptostreptococcus y Gardnerella vaginalis. En este caso se puede usar anticoagulante tipo heparina, citrato de sodio y EDTA (ácido etilendiaminotetracético).
• Con el fin de aumentar la probabilidad de recuperación de microorganismos, se recomienda inocular la muestra en una sola botella de hemocultivo (relación 1:10 cc).

Líquido amniótico y fluido de culdocentesis deben ser transportados en medio anaerobio. En el liquido amniótico los virus que causan infección en el útero son CMV, Parvovirus B-19 y VIH, menos frecuentemente observados virus herpes simplex (HSV) y virus Zoster (VZV). Para búsqueda de hongos se utiliza la misma técnica.

Transporte: Inmediatamente después de la recolección a temperatura ambiente. Para cultivo de mycobacterias el tubo debe ser protegido de la luz directa. Si se requiere PCR (reacción en cadena de polimerasa) se debe transportar en recipiente con hielo seco

Líquido Cefalorraquídeo: Cuidados y Recomendaciones

• Enviar, además de LCR, un tubo con suero sanguíneo 2 cc refrigerado.
• Enviar con resumen de historia clínica.
• Procedimiento realizado por personal médico

Transporte: Inmediato a temperatura ambiente

Líquidos Orgánicos

Algunos de los líquidos orgánicos que se pueden estudiar son:

• Líquido Amniótico: Se encuentra rodeando el feto durante su desarrollo dentro de la madre.
• Líquido Cefalorraquídeo: Rellena las cavidades del cerebro para protegerlo así como a la médula espinal.
• Líquido Pleural: Se encuentra en la cavidad pleural como lubricante en el movimiento de los pulmones.
• Líquido Sinovial: Está en las articulaciones, entre los huesos actuando como lubricante.
• Líquido Pericárdico: Actúa como lubricante en el movimiento del corazón.
• Líquido Peritoneal: Está en la cavidad abdominal actuando como lubricante para los órganos durante el movimiento de la digestión.

Tracto Genital

Secreciones Uretrales: Cuidados y Recomendaciones

• Verificar que se haya realizado una limpieza previa y adecuada de los genitales externos para eliminar secreciones contaminantes.
• La muestra se debe tomar al menos una hora después de que el paciente haya orinado.

Transporte: Se recomienda en los primeros 15 minutos de la recolección a temperatura ambiente

Secreciones Cervicales: Cuidados y Recomendaciones

• La paciente debe haber suspendido el tratamiento antibiótico, aplicación de óvulos o duchas vaginales 3 días antes de la toma de la muestra.
• Evitar tener relaciones sexuales 3 días antes de la toma de la muestra y no realizar la toma durante el sangrado menstrual.
• Este procedimiento está contraindicado en pacientes embarazadas.
• Utilizar espéculo estéril o desechable. No usar lubricantes durante el procedimiento.
• En caso de sospechar presencia de Chlamydia trachomatis tomar la muestra con el escobillón de transporte correspondiente suministrado por el laboratorio; en este caso no se realiza extendido en lámina de vidrio

Transporte: Se recomienda inmediatamente sin exceder más de 15 minutos y a temperatura ambiente.

Secreciones Prostáticas: Cuidados y Recomendaciones

• Verificar que el paciente haya evacuado la vejiga.
• Realice la limpieza del meato uretral con agua y jabón

Transporte: Se recomienda en los primeros 15 minutos de la recolección, no exceder de dos horas y a temperatura ambiente

Secreciones Vaginales: Cuidados y Recomendaciones

• La paciente no debe aplicar óvulos o duchas vaginales 24 horas antes de la toma de la muestra.
• Verificar que se haya realizado una limpieza adecuada de los genitales externos previamente, para eliminar secreciones contaminantes.

Transporte: Hacer la lectura lo más pronto posible; de lo contrario, mantener el tubo con el escobillón a 37°C con el fin de evitar la pérdida de movilidad de las Trichomonas.

Aspectos Generales para la Toma de Muestra

1. Recomendaciones para la toma de muestras
2. Solicitud de estudio
3. Precauciones de bioseguridad
4. Preparación de elementos
5. Equipo de asepsia y antisepsia
6. Preparación de la piel: limpieza y antisepsia
7. Técnica de extendido
8. Identificación de muestras
9. Condiciones generales de almacenamiento y transporte

Aislamiento

Contagio

Implica la entrada y posible multiplicación de agentes patógenos en el organismo (que pueden tener origen bacteriano, viral, fúngico o protozoario); esta infección puede provocar el estado latente o completo de la enfermedad; durante su curso, los agentes infecciosos, pueden escapar del organismo y constituir una fuente de contagio para otros individuos.

Aislamiento: Objetivo

Romper con la cadena de transmisión del agente infeccioso

1. Agente causal
2. Vía de transmisión
3. Huésped

Mecanismos de Transmisión

Aislamiento Estricto

Pacientes con enfermedades muy infecciosas que pueden transmitirse a través del aire o por contacto físico

Medidas de Protección:

• Habitación individual
• Puertas y ventanas cerradas
• Calzado, bata y guantes (se colocan y se quitan dentro de la habitación)
• Las personas deben de portar cubrebocas antes de entrar a la habitación

Aislamiento Entérico

Prevención de las enfermedades por contacto directo o indirecto con las heces de los pacientes

Medidas de Protección:

• Medidas de protección:
• Habitación individual
• Lavado de manos (al salir de la habitación)
• Batas y guantes

Aislamiento por Contacto

Pueden ser de dos tipos, por secreciones cutáneas y secreciones orales

Medidas de Protección:

• Todo el material debe estar dentro de la habitación
• Lavado de manos al salir de la habitación
• Guantes y bata (cuando haya contacto estrecho)
• Mascarilla (cuando haya riesgo de salpicaduras)

Aislamiento Respiratorio

La transmisión del agente se realiza a través del aire por gotas evaporadas (menor a 5 micras), o por gotas de Flügge (mayor a 5 micras) en una distancia igual o superior a 1 metro.

Medidas de Protección:

• Habitación individual con presión negativa, puerta cerrada
• Lavado de manos
• Guantes y bata (cuando el contacto es estrecho)
• Mascarillas de alta resolución

Aislamiento Protector o Inverso

Se protege al paciente inmunodeprimido e inmunodepresor

Medidas de Protección:

• Habitación individual
• Puerta cerrada
• Calzado, gorro, mascarilla, bata y guantes se colocan antes de entrar

Medidas de Prevención en Procedimientos Intra y Extrahospitalarios

1. Heridas quirúrgicas
2. Heridas
3. Catéteres
4. Sondas
5. Canalizaciones vasculares

Profilaxis Post-Exposición Ocupacional

Tipos de Exposición

Accidental: Es el contacto no deseado ni esperado que se produce con un fluido potencialmente infectante por vía parenteral ya sea a través de una lesión percutánea, por piel no intacta o por membranas mucosas como las de boca, ojos, vagina o recto

Ocupacional: Es aquella que ocurre con ocasión o a consecuencia de la realización de un trabajo y puede suponer un riesgo de infección para el trabajador. Se denomina también exposición laboral.

No ocupacional: Es el contacto con sangre o fluidos potencialmente infecciosos fuera del ámbito laboral

Fluidos Potencialmente Infecciosos

Se consideran potencialmente infecciosos fluidos tales como sangre, semen, secreciones vaginales, leche materna, líquidos cefalorraquídeo, pleural, peritoneal, pericárdico, amniótico y sinovial. También se consideran potencialmente infecciosos los tejidos, órganos, cultivos celulares y los concentrados de virus de laboratorio.

La Profilaxis Post Exposición se Plantea como una Estrategia de Prevención Biomédica

Cada institución debería promover la asignación de recursos para:

• La educación y entrenamiento de todo el personal en las precauciones universales.
• Disponer de los materiales necesarios para actuar como barrera (guantes, mascarillas, batas y gafas protectoras), así como contenedores de material desechable potencialmente contaminado y dispositivos de seguridad
• Garantizar el asesoramiento y la asistencia las 24 horas del día con disponibilidad de diagnóstico serológico preferiblemente en menos de 2 horas para el VIH y siempre antes de las 72 horas y para el virus B y C lo antes posible y siempre antes de las 96 horas
• Facilitar el acceso a la medicación en los casos necesarios en los plazos establecidos
• Establecer los protocolos de seguimiento adecuados
• Disponer de profesionales encargados de la atención y seguimiento de los casos de exposición ocupacional
• Establecer criterios de notificación centralizada para crear un registro a través de los Servicios de Prevención de Riesgos Laborales (SPRL) y valorar la eficacia de las intervenciones.

En Heridas Cutáneas (Punciones, Cortes), Salpicaduras a Piel No Íntegra, se Recomienda:

• Lavado con agua y jabón
• Dejar fluir la sangre
• Desinfectar la herida con un antiséptico (povidona yodada, gluconato de clorhexidina)
• Cubrir con un apósito impermeable.
• En salpicaduras a mucosas (conjuntiva, etc…) se recomienda lavado con agua abundante o suero fisiológico.
• En ningún caso se aplicarán agentes cáusticos.
• No se recomienda “exprimir”, porque induce hiperemia, que puede aumentar el riesgo de adquirir la infección.

Tipos de Exposición Ocupacional

Con la finalidad de poder valorar el riesgo, hemos de tener en cuenta una serie de factores que dependen del tipo de exposición y otros en relación directa con el accidente.

Con respecto a los factores relacionados con el accidente, éste dependerá de la profundidad del pinchazo:

• Inoculación accidental superficial: erosión
• Profundidad intermedia: aparición de sangre
• Inoculación accidental profunda

Cuanto mayor sea la profundidad mayor será el riesgo de transmisión del tipo de material utilizado:

1. Aguja hueca: mayor riesgo que con las agujas de sutura, ya que estas últimas sólo presenta una fina lámina de fluido en la superficie de la aguja)
2. Aguja maciza o bisturí