Ventajas y desventajas del microscopio optico


De transmisión:
Es un instrumento que permite conocer la ultraestructura de las células y la matriz extracelular, ya que posee un poder de resolución mayor que el microscopio óptico. Posee un filamento que se calienta y emite electrones, y por una bovina electromagnética que cumple las funciones del condensador en el microscopio óptico, los electrones se concentran en el plano donde se coloca el material. Una segunda bovina funciona como una lente objetivo, lo que da una imagen agrandada del objeto en observación. Esta imagen es recibida por una tercera lente electromagnética que aumenta la imagen que proviene del objetivo. La imagen final es plana y se observa sobre una pantalla fluorescente o en una placa fotográfica


De barrido:
Se emplea un haz de electrones que actúa sobre la superficie del material donde excitan a las moléculas de la muestra , los cuales emiten un delgado haz de electrones secundarios que son desviados hacia un tubo fotomultiplicador generando imágenes tridimensionales en una pantalla.

El microscopio de interferencia es similar al de contraste de fase con la diferencia que tiene mayor sensibilidad para detectar los índices de refracción, por lo tanto, se obtiene una imagen a color. Con este microscopio se aprecian los cambios que se producen en la masa seca de los cultivos celulares durante los procesos de crecimiento y división.


La luz ultravioleta es la luz que menos longitud de onda tiene, como el poder de resolución está en razón inversa a la  longitud de onda, el poder de resolución será mayor que con luz visible (prácticamente el doble). Exige que las lentes sean de cuarzo, además, al ser la luz UV invisible al ojo humano, debe convertirse en visible mediante fotografía, fosforescencia o técnicas de fotoemisión (escáner electrónico). Se usa fundamentalmente para detectar y cuantificar ácidos nucleicos. No se puede mirar por el ocular (observación directa) ya que la luz UV dañaría la retina.


Se utiliza para ofrecer unaimagenestereoscópica(3D) de la muestra. Para ello, y como ocurre en lavisión binocularconvencional, es necesario que los dos ojos observen la imagen con ángulos ligeramente distintos. Obviamente todos los microscopios estereoscópicos, por definición, deben ser binoculares (con un ocular para cada ojo), por lo que a veces se confunden ambos términos. El microscopio estereoscópico es apropiado para observar objetos de tamaños relativamente grandes, por lo que no es necesario modificar los objetos a ver, ni tampoco lo es que la luz pase a través de la muestra. Este tipo de microscopios permite unas distancias que van desde un par de centímetros a las decenas de ellos desde la muestra al objetivo, l


            Recibe el nombre de fluorescencia la propiedad que poseen determinadas sustancias (sustancias fluorescentes) de emitir bajo la acción de radiaciones de longitud de onda corta, otras radiaciones de longitud de onda más larga, denominada fluorescencia. Así, la luz UV (invisible) excita materiales fluorescentes y estos emiten radiaciones de colores característicos.

            Cuando un objeto fluorescente se expone a la luz UV, puede ser percibido como un objeto brillante sobre fondo oscuro. La observación es directa y se suele registrar en placa fotográfica.


Es una  técnica de observación microscópica relativamente novedosa con numerosas aplicaciones en distintos campos como la medicina, biología, materiales, geología etc. Nos permite obtener imágenes secciones ópticas de la muestra con más contraste, nitidez y resolución y la posibilidad de realizar estudios tridimensionales de la misma.Es una variante de la fluorescencia ya que utiliza fluorocromos. Utilizamos un haz de luz coherente producida por un laser que se hace incidir sobre la muestra (previamente marcada con fluorocromos), recogiéndose la luz  fluorescente reflejada con un detector (fotomultiplicador) que se digitaliza almacenándose en el ordenador.

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Al iluminarse sólo  pequeñas zonas de la muestra, para el estudio de la totalidad se realizará un barrido (scanning) de la misma, haciendo que el haz de laser se desplace por la muestra, en algunos modelos es ésta  la que se desplaza.La luz atraviesa un primer diafragma, reflejándose mediante un espejo dicroico y enfocándose en el espécimen.La fluorescencia emitida volverá a través del espejo y se enfoca sobre el detector previo paso por un segundo diafragma (pinhole) que eliminará la luz fuera de foco. Esto puede repetirse a través de las distintas capas, a distintas profundidades, obteniéndose una imagen tridimensional


El microscopio de polarización es un microscopio que se utiliza principalmente en los estudios geológicos para estudiar muestras geológicas. Por esta razón, también es conocido como microscopio petrográfico.
Se utiliza en otros campos científicos como la medicina y la biología también.
Los microscopios de polarización están construidos como el  microscopio óptico convencional, pero cuentan con algunas características adicionales.
A diferencia de los microscopios ordinarios que utilizan la luz normal, un microscopio de luz polarizada utiliza luz polarizada para estudiar las muestra. En la luz polarizada, las ondas de luz vibran en una dirección, a la luz normal, las ondas de luz vibran en direcciones aleatorias


cFASESPermite observar células sin colorear y resulta especialmente útil para células vivas, aprovecha las pequeñas diferencias de los índices de refracción en las distintas partes de una célula y en las distintas partes de una muestra de tejido. La luz que pasa por regiones de mayor índice de refracción, experimenta una deflexión y queda fuera de fase con respecto al haz principal de ondas que pasaron la muestra. Además aparea otras longitudes de onda fuera de fase por medio de anillos ópticos del objetivo y del condensador. Las partes oscuras de la imagen corresponden a las porciones densas del espécimen y las claras corresponden a las porciones menos densas.


Microscopio de campo oscuro

Utiliza un haz de luz muy intensa en forma de cono hueco concentrado sobre el espécimen. El objeto iluminado dispersa la luz y se hace así visible contra el fondo oscuro que tiene detrás, las porciones transparentes del espécimen quedan oscuras, mientras que las superficies y partículas se ven brillantes por la luz que reciben y dispersan en todas las direcciones.  El condensador sólo posee un anillo que emite luz, luego los rayos llegan ala muestra de manera oblicua y el objeto iluminado dispersa la luz por el fondo oscuro.


 permite aprovechar al máximo las capacidades de las lentes iluminan la muest en estudio con un campo de luz u cuyo diáme sea igual al del área de captura del objetivo.se enfoca la muestra, a continua se cierra el diafragma de campo. El condensador se desplaza verticalmente hasta obtener una imagen nítida de dicho diafragma. Ahora centraremos dicha imagen mediante el uso de los tornillos centradores del condensador. La iluminación ideal se consigue cuándo el condensador se encuentra muy  cerca de la preparación. El diafra de campo regula el diámetro de la apertura de la iluminacy al cerrarlo se incrementan los contrast. Una vez ajustada la iluminación Köhler no se debe regular la intensidad de la luz o el brillo bajando el condensador o cerrando la apertura de diafragma-iris, por el contrario, se regula intensidad de la lámpara mediante el ajuste de voltaje.

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